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Cytation5細胞成像微孔板檢測系統為用戶提供了完備而靈活的成像方式并具備強大的圖像處理功能, 足以和顯微鏡和成像系統相媲美。廣泛的成像應用、靈活可升級的模塊化設計以及具有競爭力的價格,使Cytation5可以配合各類實驗室的應用。其獨特的Gen5數據分析軟件功能強大, 操作界面友好,使用便捷,并可以與其他自動化設備進行對接。
1、全自動顯微鏡&多功能微孔板檢測儀:
(1)自動XY載物臺 樣品定位和載物臺移動簡單而準確
(2)自動LED 可達99%強度輸出
(3)自動曝光 為全板提供均衡曝光強度
(4)基于用戶定義的自動聚焦 可提高聚焦的重現性并可根據不同用戶的不同需求選擇聚焦方式2、多功能微孔板檢測
Cytation5的微孔板檢測功能可以完成熒光強度、時間分辨熒光、熒光偏振、AlphaScreen®/AlphaLISA®、 發光和紫外/可見吸收光檢測。Hybrid技術將基于濾光片和光柵的檢測光路整合于一套系統之中,為用戶提供了強大的孔板檢測功能,滿足細胞水平和其他生物化學分析的檢測要求。
3、模塊化可升級設計
Cytation5采用模塊化的設計,因此便于客戶根據具體實驗需求任意選擇功能模塊的組合,并且可以在未來 進行其他功能模塊的升級。
4、四大核心功能:
(1)培養:Cytation5可以配合優異的氣體控制模塊,為細胞生長提供適合的CO2/O2環境, 另外可以通過程序控制環境的溫度,可達65ºC,并且具有線性、軌道和雙軌道等震蕩模式可選,程序控制震蕩 的強度和持續時間。一套獨立的雙自動加樣器可以隨時為實驗操作提供準確的試劑加樣操作,尤其對于那些加樣后 需要立即檢測的實驗,是非常實用而有效的功能模塊。
(2)成像:Cytation5可提供很簡單快速的細胞成像,其多樣的檢測功能包括:倒置熒光成像、 明場及H&E染色成像、相差成像等。配合氣體控制、多種檢測耗材和豐富的檢測模式,使Cytation5成為一套強大的細胞成像檢測工作站。Gen5軟件可以提供簡單方便的圖像捕獲操作,不論是聚焦、LED強度還是曝光均可全自動完 成。16bit科學級CCD采用索尼公司的芯片,同時配合高質量光學元件可以提供優異的圖像質量。
(3)檢測:Cytation5的孔板檢測模塊應用更為廣泛,其多功能檢測系統可以完成熒光強度、時間 分辨熒光、熒光偏振、Alpha檢測、發光以及紫外/可見吸收光的檢測。所有檢測模式均兼容6-384孔板。如果在實驗流 程中隨后加入細胞成像操作,Gen5軟件的Hit Pick功能可以根據檢測信號的強度閾值來挑選出目標孔進行成像。 以上流程既提高了效率又極大的減少了數據分析量,同時也節省了數據的存儲空間。
(4)計數:Cytation5可以通過Gen5軟件進行定量檢測和圖像采集與分析。只需輕點鼠標即可輕松完成微孔板內培養細胞的計數工作。細胞計數和成像統計均可以自動完成,其分析選項靈活而強大,無論是細胞培養板 還是玻片,均可勝任。
5、強大的孔板檢測性能
(1)溫控模塊:Cytation5配備了BioTek的4-Zone溫控技術,具有高達65ºC的溫控范圍和在37ºC時±0.2ºC 的優異溫控準確性。自然對流的加熱方式可有效降低邊緣效應,當實驗板帶蓋或被封閉,可以通過在板頂和板底分別設定差異溫度來有效降低凝集現象的產生,這一先進的抗凝集技術,可有效避免凝集現象對實驗檢測結果所產生的干擾。
(2)先進的震蕩模式:Cytation5具有線性、軌道和雙軌道三種不同的震蕩模式,以滿足不同樣品的檢測需求,線性震蕩為ELISA等實驗分析提供強力的震蕩效果;軌道震蕩相對溫和,可以為貼壁細胞類的實驗提供保護;而雙軌道震蕩則提供不同方向的震動,以保證細胞和細菌樣品處于懸浮狀態。無論何種震蕩模式,用戶均可以通過程序設 定來震蕩的頻率和時間。
(3)光柵檢測帶寬連續可調:Cytation5配備了新一代光柵系統,其帶寬9-50nm連續可調1nm步進, 與傳統光柵系統的固定帶寬相比,能夠更好的配合熒光染料的特性,并且可靈活調整激發與發射側光柵的帶寬,以 保證不同熒光染料檢測的靈敏度。
(4)跳躍加樣與檢測:具有超級靈活的加樣和檢測模式,用戶可以根據樣品的實驗排布或孔板使用的情況,選擇任意孔進行操作。
(5)高密度孔域掃描:對于不均一樣品或細胞培養樣品,需要對全孔的信號進行掃描并計算均數, Cytation5可實現高達99x99的矩陣掃描,用戶可根據矩陣圖判斷樣品的信號分布并自動給出均數。
6、典型應用:
細胞成像與分析、細胞增殖、細胞毒性、蛋白表達、分子標記定量、藥物研發、基因表達、藥物吸收與代謝、生物藥物研發與篩選、環境監測、食品安全、核酸定量、蛋白定量、細胞遷移、細胞計數、H&E染色成像、亞群分析、Hit篩選等
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常規:
孔板類型:6-1536孔板
其他耗材:玻片,細胞培養瓶(T25),細胞培養皿,微量檢測板
溫度控制:4-Zone溫控模塊,zui高溫控 65°C,具有抗凝集功能,溫控精度±0.2°C@37°C
震蕩模式:線性,軌道,雙軌道
軟件:Gen5圖像數據獲取及高級分析軟件
自動化:兼容BioSpa8、BioStack及第三方自動化設備
氣體控制:范圍:0-20% (CO2),1-19% (O2);分辨率:±0.1% (CO2和 O2);穩定性:±0.2% @ 5% CO2;±0.2% @1% O2;可選CO2和O2或僅CO2控制
成像:
相機:Sony16-bit 灰階CCD,125萬像素,0.3μm/像素點@20x
像素點尺寸:6.45μm
相機整合:2x2Binning可選
曝光時間:5ms-4s
成像模式:熒光場,明場,彩色明場,相差及數碼相差
成像方式:單色,多色,蒙太奇,時間延遲,Z-軸層切,觸發模式
圖像處理:Z-軸疊加,數碼相差,圖像拼合
位置控制:Joystick控制和軟件控制
自動功能:用戶定義自動聚焦,自動聚焦,自動曝光,自動LED強度
色彩模塊:機載4位用戶可置換色彩模塊,18種色彩可選
物鏡位置:6位用戶可置換物鏡
可選物鏡:1.25x,2.5x,4x,10x,20x,40x,60x;相差物鏡: 4x,10x,20x,40x
聚焦方式:基于圖像、基于激光的自動聚焦和用戶自定義聚焦
采集速率:10幀/秒 ,單色,全分辨率;20幀/秒,單色,2x2Binning
拍攝速度:
96 孔板,單色,4x物鏡:基于圖像 6 分鐘;基于激光<3分鐘
96 孔板,三色,4x物鏡:基于圖像12 分鐘;基于激光<7分30秒
圖像輸出:
原始圖像:16bit TIFF
保存圖像:TIF,JPG,BMP,PNG,EMF,GIF
視頻:MP4,WMV
視頻制作:實時視頻或隊列圖片合成視頻
孔板檢測:
光源:高能量氙燈,用于吸收光/熒光檢測;100mW激光器,用于Alpha檢測
波長選擇:四光柵;深度阻擋濾光片
波長范圍:200-850nm
帶寬選擇:9-50nm連續可調,1nm步進
檢測器:雙PMT
動態范圍:>7個數量級
熒光靈敏度:0.25pM(0.025fmol/孔 384孔板)
發光靈敏度:10amol (閃光);100amol(輝光)
BRET:可以
偏振靈敏度:1.2mP
時間分辨熒光靈敏度:Eu 40 fM(4amol/孔 384孔板)
吸收光波長選擇:雙光柵單色器
吸收光波長范圍:230-999nm,1nm步進
吸收光帶寬:4 nm (230-285 nm),8 nm (>285 nm)
吸收光動態范圍:0-4 OD
吸收光分辨率:0.0001 OD
檢測速度:96孔板11秒;384孔板22秒
自動加樣器:
數目:2個
支持模式:所有模式
分液體積:5-10000μL,1μL步進
孔板類型:6-384孔板,細胞培養皿
分液zh'q性:≤2% @ 50-200 μL
分液準確性:±1μL或2%
物理:
功率:zui大250W
體積:長50.8 cm x 寬41.91 cm x 高44.5 cm
重量:80 lbs (36.3 Kg)
標準:CE和TUV 認證,RoHS 兼容 -
一、細胞成像應用
1、人U-2 OS細胞采用BacMam法轉染后的細胞成像及轉染效率分析
組織細胞瞬時轉染的常規方法是在培養的細胞中引入新型的基因元件。但是,在向許多組織細胞中引入外源DNA的操作過程中,實驗轉染效率主要依賴于引入基因的適量表達。這篇應用中,我們介紹在活細胞中采用BacMam基因傳遞系統和Cytation細胞成像多功能微孔板檢測儀,優化和評估基因表達和轉染效率。
2、活細胞呼吸與線粒體功能實時監測
呼吸與代謝是細胞正常功能的重要指示劑,可作為研究線粒體功能的參數以及作為觸發氧化磷酸化轉化為有氧糖酵解標志因子。LuxcelTM公司采用特殊的熒光標記探針,可以實時監測細胞外耗氧率、細胞外產酸率以及細胞內氧含量,用于評估活細胞電子傳遞鏈和糖酵解通路的活性。
3、高通量RNAi細胞芯片庫分析
采用專利的RNAi成像芯片板,每張芯片上含有3200個完全獨立的SiRNA微點,每個微點上包含了介導SiRNA進入微點區域培養細胞的試劑。所有微點矩陣排列并具有編號,每個微點代表一個獨立的RNAi實驗,因此可以實現芯片式高通量RNAi成像分析。
4、利用3D腫瘤細胞侵襲法進行yao物篩選
全新的3D細胞培養技術可以誘導細胞按照正常的組織構架和通信網絡進行生長,大量應用于體外的yao物篩選實驗。本文采用3D細胞培養技術,促使腫瘤細胞與其他成分細胞抱團生長成為腫瘤樣球體,通過微孔板的相關操作,利用明場及熒光場的分層成像與疊加對腫瘤抑制劑的代謝與殘留進行分析,并在3D細胞團的基礎上進行kang腫瘤侵襲yao物的篩選評估。
5、基于血細胞計數板的自動化活/死細胞計數
細胞計數是常規的生命科學實驗之一。在日常細胞傳代和進行細胞學實驗時,都需要對細胞進行計數。雖然有多種儀器設備可以進行自動化的細胞計數工作,但使用血細胞計數板仍是成本很低的方法。通過使用配備相差成像模塊的Cytation5可以實現血細胞計數板的細胞計數工作。這一自動化的方法相對人工計數更為準確。除此之外,通過臺盼藍染色細胞成像還可獲得細胞存活比率的數據。
6、利用相差成像技術對細胞形態及凋亡進行分析
基于細胞表型或基于細胞、組織、器官效應的分子yao物篩選可追溯到比較早的yao物研發。其中基于凋亡的表型研究也是其中的重點,尤其是在腫瘤研究方面,可以幫助研究人員了解疾病的發病機制和探索可能的治liao手段。Cytation5的相差成像模塊和氣體控制模塊相配合,可以無需任何外界干預手段(如標記、固定、裂解等),動態細胞成像,并通過細胞圓度的分析,對細胞凋亡情況進行評價。
二、微孔板檢測應用
Cytation5以其獨特的光路設計保證了檢測的靈活性和高靈敏性,可以適用于幾乎所有的非同位素檢測技術,包括Alpha技術 (AlphaScreen/AlphaLISA)、熒光偏振 (FP)、時間分辨熒光 (TRF)、熒光強度、發光及吸收光檢測。
1、信號通路研究:Alhap篩選、TRF以及FP技術都可以用于信號轉導通路研究,包括激酶研究、分子間相互作用以及翻譯后修飾。
2、離子通道研究:采用熒光或發光的標記方法,可以和細胞內的鈣離子進行特異性的識別,并改變其發射光光譜特性,配合快速檢測的自動加樣裝置,可以保證離子流檢測的準確。
3、報告基因研究:滿足帶有注射器的閃爍發光檢測,GFP檢測,基于熒光的報告基因檢測和基于發光的BRET檢測。
4、酶學研究:具有7個數量級的動態范圍及短間隔、長時間的快速動力學檢測,滿足各類酶學研究的需求。
5、基因分型研究:基于濾光片系統的熒光偏振模塊可用于SNP的基因分型研究。
6、細胞增殖及毒性研究:由于具有微孔板檢測的所有技術,可以配合功能模塊進行基于標記或ATP的細胞增殖及毒性研究。
7、定量檢測:靈活方便的吸收光檢測模塊,包括紫外和可見光檢測以及光譜掃描,同時兼容Take3微量檢測板,因此適用于DNA、蛋白定量及ELISA定量等。